液相色谱-高分辨质谱测定贝类中软骨藻酸

doi:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.09.034

湖北农业科学 ›› 2020, Vol. 59 ›› Issue (9): 159-161.doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2020.09.034

液相色谱-高分辨质谱测定贝类中软骨藻酸

吴祥庆¹, 余焘², 吴明媛¹, 黄国秋¹, 杨姝丽¹

1.广西壮族自治区水产科学研究院,南宁 530021;
2.广西壮族自治区土壤肥料工作站,南宁 530007

收稿日期:2020-02-18 发布日期:2020-07-22
通讯作者: 杨妹丽﹐高级工程师﹐硕士,主要从事水产品检测技术研究工作,(电话)13878178627(电子信箱)13878178627@qq.com。
作者简介:吴祥庆(1977-),男,广西玉林人,副研究员,主要从事水产品检测技术研究工作,(电话)13878602255(电子信箱)wuxianging19@l63.com。
基金资助:
广西重点研发计划项目(桂科AB16380290)

Determination of domoic acid in shellfish by liquid chromatography-orbitrap mass spectrometry

WU Xiang-qing¹, YU Tao², WU Ming-yuan¹, HUANG Guo-qiu¹, YANG Shu-li¹

1. Guangxi Academy of Fishery Sciences,Nanning 530021,China;
2. Soil and Fertilizer Working Station of Guangxi Zhuang Autonomous Region,Nanning 530007,China

Received:2020-02-18 Published:2020-07-22

摘要/Abstract

摘要： 软骨藻酸（DA）是一种由拟菱形藻属硅藻产生的神经毒素,可累积在贝类体内,食用受软骨藻酸污染的贝类产品可引起记忆丧失、眩晕、昏迷甚至死亡等症状。研究建立了贝类产品中软骨藻酸的液相色谱-高分辨质谱检测方法。以牡蛎和文蛤为研究对象,样品经甲醇提取、采用QuEChERS净化,经Hypersil GOLD C₁₈色谱柱分离,乙腈和2 mmol/L甲酸铵溶液（含0.2%甲酸）为流动相梯度洗脱,正离子全扫描+数据依赖二级扫描,提取一级谱图中准分子离子精确质量数定量,二级质谱图中特征离子精确质量数定性。结果表明,软骨藻酸在6 min内出峰,定量限0.01 mg/kg,在25~500 μg/L线性良好,R²=0.999 8,回收率为90.5%~106.3%,相对标准偏差（RSD）小于6.0%（n=6）。该方法简单、快速、灵敏度高,能满足贝类中软骨藻酸的测定。

关键词: 贝类, 软骨藻酸, 高分辨质谱

Abstract: Domoic acid （DA） is a kind of neurotoxin produced by Pseudo-nitzschia diatom that can accumulate in shellfish. Consuming shellfish products contaminated by domoic acid can cause memory loss, dizziness, coma and even death. In this paper, a method was established for the simultaneous determination of domoic acid （DA） in shellfish by liquid chromatography-orbitrap mass spectrometry. Oyster and clam samples were extracted with methanol and purified with QuEChERS technology. The analytes were isolated by Hypersil GOLD C₁₈column and gradient eluted with acetonitrile-2 mmol/L ammonium formate solution （0.2% formic acid）. DA were determined by orbitrap mass spectrometry through positive ion scanning, full scan mode and data dependent scan mode. The experimental results indicated that the retention time of DA was all within 6min. The limits of quantification （LOQ） was 0.01 mg/kg. The calibration curves showed good linearity within the concentration range of 25~500 μg/L, R²=0.999 8. The average recoveries was between 90.5%~106.3% and the relative standard deviations （RSD） were less than 6.0% （n=6）. This method was easy, rapid and sensitive, and could be applied in the determination of domoic acid in shellfish.

Key words: amnesic shellfish toxin, domoic acid, high resolution mass spectrometry

中图分类号:

O657.6

吴祥庆, 余焘, 吴明媛, 黄国秋, 杨姝丽. 液相色谱-高分辨质谱测定贝类中软骨藻酸[J]. 湖北农业科学, 2020, 59(9): 159-161.

WU Xiang-qing, YU Tao, WU Ming-yuan, HUANG Guo-qiu, YANG Shu-li. Determination of domoic acid in shellfish by liquid chromatography-orbitrap mass spectrometry[J]. HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES, 2020, 59(9): 159-161.

参考文献

[1] 王生福, 杨傲傲, 刘华雪, 等. 拟菱形藻软骨藻酸产生影响因素及检测方法研究进展[J]. 中国渔业质量与标准,2019,9(3):34-44.
[2] 刘恒. 痕量软骨藻酸贝毒的高灵敏分析技术研究及应用 [D]. 福州:福州大学,2017.
[3] 王九明, 陈军辉, 何秀平, 等. 基于固相萃取膜盘技术分离富集海水中软骨藻酸[J]. 分析化学, 2019,47(7):1075-1081.
[4] 阮雯, 纪炜炜, 岳冬冬, 等. 贝类生物毒素研究进展[J]. 渔业信息与战略, 2017,32(4):276-280.
[5] 王茜,程金平,高利利,等. 记忆缺失性贝毒软骨藻酸的污染现状及检测技术[J]. 安徽农业科学,2011,39(26):16070-16073.
[6] 高治昊,林郑忠,陈晓梅,等. 贝类产品中软骨藻酸的HPLC检测方法[J]. 集美大学学报(自然科学版),2015,20(4):255-259.
[7] 刘淑娟,赵晓祥,王茜,等. 软骨藻酸快速检测方法技术研究[J]. 上海交通大学学报(农业科学版),2014,32(2):10-14.
[8] 李芳,李雪梅, 李献刚, 等. 贝类毒素检测方法研究概况[J]. 食品研究与开发,2015,36(23):184-186.
[9] 顾佳萍,袁涛. 赤潮毒素软骨藻酸检测方法研究进展[J]. 海洋通报,2010,29(4):472-477.
[10] 卫锋,程日方, 宫静宏, 等. 高效液相色谱法测定贝类中的软骨藻酸[J]. 色谱, 2001(3):248-250.
[11] 赵芮,刘磊, 刘丽, 等. 酶联免疫吸附法和液相色谱-质谱联用法分析海洋生物中记忆缺失性贝毒[J]. 分析试验室,2015,34(8):882-885.
[12] 洪专, 张怡评, 陈伟珠, 等. 高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆和尿液中记忆丧失性贝毒软骨藻酸[J]. 分析科学学报,2014,30(3):319-322.
[13] 陈燕清,陈舜胜,于慧娟,等. 液相色谱-串联质谱法测定虾夷扇贝和长牡蛎中软骨藻酸的残留[J]. 分析试验室,2010,29(12):21-24.
[14] 宋琍琍, 张海琪, 侯镜德, 等. 液相色谱-串联质谱法测定贝类毒素软骨藻酸的残留[J]. 水产学报, 2008,32(6):950-956.
[15] 卫锋, 赵守成, 李大志. 液相色谱-电喷雾离子阱质谱法测定贝类中软骨藻酸[J]. 分析测试学报,2004(S1):220-222.
[16] 方晓明, 卫峰, 范祥, 等. 液相色谱/四极杆-飞行时间质谱测定失忆性贝毒的研究[J]. 分析测试学报,2004(S1):240-241.
[17] 王婵, 赵永拓, 彭心婷, 等. QuEChERS法联合高效液相色谱法快速检测扇贝中的软骨藻酸[J]. 食品安全质量检测学报,2015,6(1):72-77.
[18] 柴继业, 王琳, 赵巧灵, 等. 固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定贝类产品中脂溶性贝类毒素[J]. 宁波大学学报(理工版),2018,31(3):65-71.
[19] 吴海燕, 郭萌萌, 赵春霞, 等. 液相色谱-串联质谱法筛查原多甲藻酸毒素及其代谢产物[J]. 色谱,2016,34(4):401-406.
[20] 刘青, 曾广丰, 王志元, 等. QuEChERS净化技术结合高效液相色谱-串联质谱法测定食用贝类产品中4种脂溶性贝类毒素[J]. 现代食品科技,2015,31(12):338-344.
[21] 曾广丰, 刘青, 王志元, 等. QuEChERS法结合高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱测定食用贝类产品中4种脂溶性贝类毒素[J]. 食品工业科技,2015,36(21):289-294.

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