鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选

doi:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.01.037

湖北农业科学 ›› 2024, Vol. 63 ›› Issue (1): 206-211.doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.01.037

鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选

李金梅, 王一婷, 潘丽梅, 黄晓东, 谭勇, 汝梅, 刘雯

广西中医药大学药学院/第一附属医院,南宁 530200

收稿日期:2022-10-19 出版日期:2024-01-25 发布日期:2024-02-05
通讯作者: 谭勇（1976-）,男,重庆人,教授,主要从事中药资源研究,（电子信箱）xjty321@163.com。
作者简介:李金梅（1998-）,女,广西灵山人,在读硕士研究生,研究方向为分子生药学,（电话）17878718953（电子信箱）2281953548@qq.com。
基金资助:
广西中医药大学博士启动基金项目（2017BS029）; 广西中医药大学青年创新研究团队项目（2018QT001）

Optimization of the ISSR system and primer screening for caulis spatholobi

LI Jin-mei, WANG Yi-ting, PAN Li-mei, HUANG Xiao-dong, TAN Yong, RU Mei, LIU Wen

College of Pharmacy/The First Affiliated Hospital, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530200,China

Received:2022-10-19 Online:2024-01-25 Published:2024-02-05

摘要/Abstract

摘要： 以鸡血藤的入药部位藤茎为试验材料,采用改良CTAB法进行DNA提取,利用正交试验和单因素试验对ISSR-PCR反应体系进行优化和构建。结果表明,鸡血藤最佳ISSR-PCR反应体系为DNA模板60 ng,Taq酶2.00 U,Mg²⁺浓度1.75 mmol/L,dNTP浓度 0.25 mmol/L,引物浓度0.20 μmol/L,最佳退火温度44.6 ℃。从100条ISSR引物筛选出20条适合鸡血藤的ISSR引物。

关键词: 鸡血藤, ISSR, 分子标记, 引物筛选, 正交设计, 体系优化

Abstract: The stem of caulis spatholobi was used as the experimental material for DNA extraction using the improved CTAB method. The ISSR-PCR reaction system was optimized and constructed using orthogonal and single factor experiments. The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction system for caulis spatholobi was DNA template 60 ng, Taq enzyme 2.00 U, Mg²⁺ concentration 1.75 mmol/L, dNTP concentration 0.25 mmol/L, primer concentration 0.20 μmol/L, and optimal annealing temperature 44.6 ℃. 20 ISSR primers suitable for caulis spatholobi from were selected 100 ISSR primers.

Key words: caulis spatholobi, ISSR, molecular markers, primer screening, orthogonal design, system optimization

中图分类号:

S567.1

李金梅, 王一婷, 潘丽梅, 黄晓东, 谭勇, 汝梅, 刘雯. 鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选[J]. 湖北农业科学, 2024, 63(1): 206-211.

LI Jin-mei, WANG Yi-ting, PAN Li-mei, HUANG Xiao-dong, TAN Yong, RU Mei, LIU Wen. Optimization of the ISSR system and primer screening for caulis spatholobi[J]. HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES, 2024, 63(1): 206-211.

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鸡血藤ISSR体系优化及引物筛选

Optimization of the ISSR system and primer screening for caulis spatholobi

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