滑液囊支原体二氢硫辛酰胺脱氢酶的诱导表达及生物学特性

doi:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.12.036

湖北农业科学 ›› 2024, Vol. 63 ›› Issue (12): 205-210.doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2024.12.036

滑液囊支原体二氢硫辛酰胺脱氢酶的诱导表达及生物学特性

曹晓怡^1,2, 胡巧², 张文婷², 邓兰兰^1,2, 郭云清², 卢琴², 张蓉蓉², 张鹤平¹, 罗青平^2,3

1.河北工程大学生命科学与食品工程学院,河北邯郸 056038;
2.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,武汉 430064;
3.湖北洪山实验室,武汉 430070

收稿日期:2024-06-23 出版日期:2024-12-25 发布日期:2025-01-08
通讯作者: 张鹤平（1968-）,女,河北邯郸人,副教授,博士,主要从事动物疫病诊治研究,（电子信箱）13832092680@163.com;共同通信作者: 罗青平（1971-）,女,湖北武汉人,研究员,主要从事禽病防控研究,（电子信箱）qingping0523@163.com。
作者简介:曹晓怡（2000-）,女,湖北武汉人,在读硕士研究生,研究方向为动物疫病防控与检疫,（电话）18071547480（电子信箱）18071547480@163.com。
基金资助:
河北省重点研发计划项目乡村振兴技术创新专项（22327311D）; 湖北省农业科学院青年科学基金项目（2024NKYJJ19）; 国家肉鸡产业技术体系项目（CARS-41）; 湖北省重点研发计划项目（2022BBA0055）; 湖北省科技重大专项（2020ABA016）; 湖北省自然科学基金重点类项目（2021CFA019）

Induced expression and biological characteristics of dihydrolipoamide dehydrogenase in Mycoplasma synoviae

CAO Xiao-yi^1,2, HU Qiao², ZHANG Wen-ting², DENG Lan-lan^1,2, GUO Yun-qing², LU Qin², ZHANG Rong-rong², ZHANG He-ping¹, LUO Qing-ping^2,3

1. School of Life Sciences and Food Engineering, Hebei University of Engineering, Handan 056038, Hebei, China;
2. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430064, China;
3. Hubei Hongshan Laboratory, Wuhan 430070, China

Received:2024-06-23 Published:2024-12-25 Online:2025-01-08

摘要/Abstract

摘要： 为了获得滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）二氢硫辛酰胺脱氢酶（PdhD）的蛋白表达产物,分析蛋白的免疫原性,采用DNAStar Protean软件分析PdhD的二级结构和主要抗原域。将PdhD基因的第593、731、1 712、1 833 nt处的A突变为G,使改造成功的基因能够在大肠杆菌BL21中正确表达;经IPTG诱导后获得约70 ku的蛋白。对PdhD蛋白的622个氨基酸进行二级结构的预测,Garnier-Robson法预测出18个α螺旋中心、12个β折叠区段和17个T转角区段,Chou-Fasman法预测出24个α螺旋中心、23个β折叠区段和37个T转角区段,Karplus-Schulz法预测出42个柔性区域。PdhD的主要抗原域为Gln27-Phe36、Vla38-Val51、Ala89-Ala99、Pro137-Asp159、Gly307-Ile336、Gly369-Gly386、Gly397-Gln416、Ala433-Val447、Ieu486-Tyr504、Ala541-Asn549。免疫原性分析发现,PdhD重组蛋白能与兔源Anti-MS血清发生强烈反应,与兔源Anti-MG血清和兔源血清Blank均不发生反应。PdhD具有免疫原性,可作为候选抗原用于亚单位疫苗的研发。

关键词: 滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae,MS）, 二氢硫辛酰胺脱氢酶, 诱导表达, 免疫原性分析, 生物学特性

Abstract: In order to obtain the protein expression product of Mycoplasma synoviae （MS） dihydrolipoamide dehydrogenase （PdhD） and analyze its immunogenicity, DNAStar Protean software was used to analyze the secondary structure and main antigen domain of PdhD. A at positions 593, 731, 1 712, and 1 833 nt of the PdhD gene was mutated to G, so that the successfully modified gene could be expressed correctly in Escherichia coli BL21;after induction with IPTG, a protein of approximately 70 ku was obtained. The secondary structure of PdhD protein was predicted for 622 amino acids. The Garnier Robson method predicted 18 alpha helix centers, 12 beta folding segments, and 17 T-corner segments. The Chou Fasman method predicted 24 alpha helix centers, 23 beta folding segments, and 37 T-corner segments. The Karplus Schulz method predicted 42 flexible regions. The main antigenic domain of PdhD was Gln27-Phe36,Vla38-Val51, Ala89-Ala99, Pro137-Asp159, Gly307-Ile336, Gly369-Gly386, Gly397-Gln416, Ala433-Val447, Ieu486-Tyr504, and Ala541-Asn549. Immunogenicity analysis revealed that PdhD recombinant protein could strongly react with rabbit-derived Anti-MS serum, but did not react with rabbit-derived Anti-MG serum or rabbit-derived serum Blank. PdhD had immunogenicity and could be used as a candidate antigen for the development of subunit vaccines.

Key words: Mycoplasma synoviae （MS）, dihydrolipoamide dehydrogenase, induced expression, immunogenicity analysis, biological characteristics

中图分类号:

S858.31

曹晓怡, 胡巧, 张文婷, 邓兰兰, 郭云清, 卢琴, 张蓉蓉, 张鹤平, 罗青平. 滑液囊支原体二氢硫辛酰胺脱氢酶的诱导表达及生物学特性[J]. 湖北农业科学, 2024, 63(12): 205-210.

CAO Xiao-yi, HU Qiao, ZHANG Wen-ting, DENG Lan-lan, GUO Yun-qing, LU Qin, ZHANG Rong-rong, ZHANG He-ping, LUO Qing-ping. Induced expression and biological characteristics of dihydrolipoamide dehydrogenase in Mycoplasma synoviae[J]. HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES, 2024, 63(12): 205-210.

参考文献

[1] 刘麒, 要纬玉, 戎畅, 等. 鸡滑液囊支原体的研究进展[J]. 吉林畜牧兽医, 2023,44(6):77-78.
[2] FEBERWEE A, DE WIT J J, LANDMAN W J. Induction of eggshell apex abnormalities by Mycoplasma synoviae:Field and experimental studies[J]. Avian Pathol, 2009,38(1):77-85.
[3] CATANIA S, BILATO D, GOBBO F, et al.Treatment of eggshell abnormalities and reduced egg production caused by Mycoplasma synoviae infection[J]. Avian diseases digest, 2010,54(2):961-964.
[4] CHUN W, NAIJI Z, HAOPENG L, et al.Identification and antibiotic susceptibility evaluation of Mycoplasma synoviae isolated from chickens in central China[J]. Animal diseases, 2022,2(1):28.
[5] JINGJING Q, YU W, HAORAN L, et al.Mycoplasma synoviae dihydrolipoamide dehydrogenase is an immunogenic fibronectin/plasminogen binding protein and a putative adhesin[J]. Veterinary microbiology, 2021,265(prepublish):109328.
[6] BAO S, GUO X, YU S, et al.Mycoplasma synoviae enolase is a plasminogen/fibronectin binding protein[J]. BMC Vet Res, 2014,10:223.
[7] 李浩然,祁晶晶,王宇,等. 滑液支原体NADH氧化酶的酶学活性及亚细胞定位研究[J]. 微生物学通报,2020,47(3):801-812.
[8] 刘子卿, 尚佳静, 刘冠慧, 等. 滑液支原体分子分型及免疫原性蛋白研究进展[J]. 中国动物检疫, 2023,40(6):62-68.
[9] 包世俊. 滑液支原体膜表面丙酮酸脱羧酶的生物学特性研究[D]. 北京:中国农业科学院, 2014.
[10] CHIRANJIVI A K,DUBEY V K.Dihydrolipoamide dehydrogenase from Leishmania donovani: New insights through biochemical characterization[J]. Int J Biol Macromol,2018,112:1241-1247.
[11] 刘威, 蒋鹏程, 杨克礼, 等. 山羊支原体山羊肺炎亚种MCCG-0521乳酸脱氢酶基因的克隆表达及其编码氨基酸的生物学分析[J]. 动物医学进展, 2023,44(2):35-40.
[12] 赵宇馨. 鸡滑液囊支原体分泌蛋白MSLP53的生物学功能研究[D]. 江苏扬州:扬州大学, 2023.
[13] 李娜, 包世俊, 苏炜德, 等. 牛支原体二氢硫辛酸脱氢酶基因的克隆表达及表达产物酶比活性的测定[J]. 中国兽医科学, 2015,45(9):896-901.

[1]	赵凡, 黄闫江, 李杨, 包珩言, 田斌, 牟毅. 烟草甲和烟草粉螟的生物学特性及世代重叠形成的差异[J]. 湖北农业科学, 2024, 63(12): 46-51.
[2]	高锦运, 田怡, 肖裕玲, 莫转林, 莫美华. 三株黑皮鸡枞菌生物学特性比较[J]. 湖北农业科学, 2024, 63(11): 86-90.
[3]	陈武, 刘春华, 何鹏辉, 蔡冬波, 陈守文, 王冬. 胱硫醚-β-合成酶的高效表达及酶学性质研究[J]. 湖北农业科学, 2024, 63(11): 203-207.
[4]	文峥嵘, 罗鸣钟, 柴毅, 杨代勤, 李锐, 魏巍. 黄鳝出血病研究进展[J]. 湖北农业科学, 2021, 60(24): 5-10.
[5]	李皓, 盛希群, 刘静, 钟星. 熊果苷合成酶固定化条件研究[J]. 湖北农业科学, 2021, 60(2): 85-89.
[6]	李晓丽, 孙文松, 刘莹, 李玲, 张天静. 辽宁省玉竹根腐病病原鉴定及生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2021, 60(18): 82-85.
[7]	方毅, 毕勇, 李小春, 胡艳波, 刘湘林. 果用型三叶木通的种源选择和生物学特性[J]. 湖北农业科学, 2021, 60(1): 68-71.
[8]	王佐乾, 潘竹青, 张舒, 游景茂, 王友平, 杨小林. 湖北省黄连炭疽病的病原鉴定及其生物学特性[J]. 湖北农业科学, 2020, 59(24): 117-121.
[9]	谢瑾卉, 林英, 臧超群, 裴雪, 梁春浩. 辽宁省花生网斑病病原菌鉴定及生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2020, 59(2): 82-86.
[10]	冯世鑫, 韦玉国, 韦玉谦. 产虫茶昆虫弓须亥夜蛾的生物学特性及其趋光性研究[J]. 湖北农业科学, 2020, 59(17): 72-74.
[11]	韩艳妮, 刘艳玲. 不同牡丹品种群组合引种武汉的花期及生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2020, 59(14): 101-107.
[12]	杨绍丽, 吴仁锋. 番茄叶斑病和果斑病病原鉴定及生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2019, 58(22): 104-107.
[13]	屈国胜, 蔡正旺, 黄勇, 刘强, 李志安, 罗彬. 秦巴山区多鳞铲颌鱼种质资源调查及保护对策研究[J]. 湖北农业科学, 2019, 58(18): 93-97.
[14]	柯芳, 闫志刚, 韦树根, 姚绍嫦, 董青松. 浆果苋种子生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2018, 57(4): 79-81.
[15]	黎妍妍, 杨涛, 贾欣欣, 郑露, 黄俊斌, 许汝冰, 周鹏, 李锡宏. 湖北省烟草赤星病菌生物学特性研究[J]. 湖北农业科学, 2018, 57(22): 27-31.

滑液囊支原体二氢硫辛酰胺脱氢酶的诱导表达及生物学特性

Induced expression and biological characteristics of dihydrolipoamide dehydrogenase in Mycoplasma synoviae

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