转cry1Ab/cry1Ac基因水稻TT51-1中外源基因多重PCR检测方法

doi:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.24.056

湖北农业科学 ›› 2019, Vol. 58 ›› Issue (24): 232-235.doi: 10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.24.056

转cry1Ab/cry1Ac基因水稻TT51-1中外源基因多重PCR检测方法

查中萍¹, 万丙良¹, 殷得所¹, 杜雪树¹, 李进波¹, 夏明元¹, 戚华雄¹, 李圆梦²

1.湖北省农业科学院粮食作物研究所/湖北省粮食作物种质资源创新与遗传育种重点实验室,武汉 430064;
2.长江大学农学院,湖北荆州 434025

收稿日期:2019-08-09 出版日期:2019-12-25 发布日期:2019-12-25
通讯作者: 万丙良（1968-）,男,湖北罗田人,研究员,博士,主要从事水稻分子育种研究,（电话）18602706922（电子信箱）ricewanbl@126.com。
作者简介:査中萍（1971-）,女,安徽怀宁人,副研究员,硕士,主要从事水稻分子育种研究,（电话）13986019016（电子信箱）zhongpingzha@163.com
基金资助:
国家转基因生物新品种培育重大专项（2016ZX08001-001）

A tri-primer multiplex PCR method for the detection of exogenous genes in the cry1Ab/cry1Ac transgenic rice TT51-1

ZHA Zhong-ping¹, WAN Bing-liang¹, YIN De-suo¹, DU Xue-shu¹, LI Jin-bo¹, XIA Ming-yuan¹, QI Hua-xiong¹, LI Yuan-meng²

1.Food Crop Research Institute,Hubei Academy of Agricultural Science/Hubei Key Laboratory of Crop Germplasm and Genetic Improvement,Wuhan 430064,China;
2.College of Agriculture,Yangtze University,Jingzhou 434025,Hubei,China

Received:2019-08-09 Online:2019-12-25 Published:2019-12-25

摘要/Abstract

摘要： 针对转cry1Ab/cry1Ac基因抗虫水稻（Oryza sativa L.）TT51-1及其回交后代中外源基因的检测建立了一种三引物多重PCR检测方法。结果表明,三引物PCR体系可以准确区分cry1Ab/cry1Ac基因纯合、杂合和阴性三种基因型,纯合体中只扩增出一条298 bp片段,阴性材料中只扩增出一条787 bp片段,杂合体中同时扩增出298 bp片段和787 bp片段。该体系的建立为利用TT51-1进行抗螟虫水稻分子育种提供了一个简便有效的基因鉴定技术。

关键词: 转基因水稻, 多重PCR, cry1Ab/cry1Ac, TT51-1, 华恢1号

Abstract: A tri-primer multiplex PCR method was established for the detection of cry1Ab/cry1Ac gene in the cry1Ab/cry1Ac transgenic rice TT51-1 and its backcross progenies of Huahui No.1. According to the foreign gene sequence inserted in TT51-1 and the rice genome sequence on the left and right sides of the insertion site, three PCR primers P1, P2 and P3 were designed. The results showed that the three primers PCR system could accurately distinguish the homozygous, heterozygous and negative genotypes of cry1Ab/cry1Ac gene. Only one 298 bp fragment was amplified in homozygote and only one 787 bp fragment was amplified in negative materials. Both 298 bp and 787 bp fragments were amplified from the heterozygote. The establishment of this system provides a simple and effective gene identification technique for molecular breeding of borer-resistant rice using TT51-1.

Key words: transgenic rice, multiplex PCR, cry1Ab/cry1Ac, TT51-1, Huahui No.1

中图分类号:

S511

查中萍, 万丙良, 殷得所, 杜雪树, 李进波, 夏明元, 戚华雄, 李圆梦. 转cry1Ab/cry1Ac基因水稻TT51-1中外源基因多重PCR检测方法[J]. 湖北农业科学, 2019, 58(24): 232-235.

ZHA Zhong-ping, WAN Bing-liang, YIN De-suo, DU Xue-shu, LI Jin-bo, XIA Ming-yuan, QI Hua-xiong, LI Yuan-meng. A tri-primer multiplex PCR method for the detection of exogenous genes in the cry1Ab/cry1Ac transgenic rice TT51-1[J]. HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES, 2019, 58(24): 232-235.

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转cry1Ab/cry1Ac基因水稻TT51-1中外源基因多重PCR检测方法

A tri-primer multiplex PCR method for the detection of exogenous genes in the cry1Ab/cry1Ac transgenic rice TT51-1

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